Situs web iki nggunakake cookie supaya kita bisa nyedhiyani pengalaman panganggo sing paling apik. Informasi Cookie disimpen ing browser lan nglakoni fungsi kayata ngenali sampeyan nalika sampeyan bali menyang situs web kita lan ngewangi tim supaya ngerti bagian-bagian situs web sing paling sampeyan narik kawigaten lan migunani.
CRISPR / Cas9 kanggo ndandani gen RDEB
Suntingan gen bisa ndandani kesalahan genetis lan nggawe cangkok kulit sing sehat kanggo mbantu nambani tatu DEB.
Dr Sergio López-Manzaneda kerja ing CIEMAT ing Spanyol ing project editing gen iki kanggo mbenerake owah-owahan genetis sing nimbulaké DEB. Proyek iki nduweni tujuan kanggo nggunakake teknologi CRISPR/Cas9 anyar kanggo ndandani bagian sing rusak saka gen kolagen-7 (COL7A1) ing sel kulit sing ditanam ing laboratorium. 'Patching' genetik iki kalebu nglereni bagean saka gen lan nglebokake 'patch' kanthi urutan kerja. Yen sukses, sel kulit sing ditambal sacara genetis bisa digunakake ing mangsa ngarep kanggo nggawe cangkokan kulit sing sehat kanggo nambani tatu DEB.
Waca liyane ing blog peneliti kita.
Babagan pendanaan kita
Pimpinan Riset | Dr Sergio López-Manzaneda |
Lembaga | Yayasan Jiménez Díaz, CIEMAT, Spanyol |
Jinis EB | DEB |
Keterlibatan pasien | Ora Ana |
Jumlah pendanaan | £15,000 |
Dawane proyek | taun 1 |
Tanggal wiwitan | 1 Januari 2024 |
ID internal DEBRA | GR000042 |
Rincian proyek
Ing tengah-tengah proyek kasebut, para peneliti nglaporake yen wis sukses tekan setengah saka tonggak sejarah. 'Tambalan' genetis kasebut luwih efisien tinimbang sing dikarepake nanging luwih cilik. Iki tegese bakal mbutuhake luwih akeh lan bakal fokus ing iki kanggo separo kapindho proyek kasebut.
Peneliti Utama: Dr Sergio López-Manzaneda minangka peneliti ing CIEMAT kanthi latar mburi sing kuat ing panyuntingan genom.
Co-peneliti: Dr Fernando Larcher minangka profesor biokimia ing Universidad Carlos III de Madrid lan Kepala Divisi ing CIEMAT (Divisi Biomedicine Epithelial).
Alex Bassons Bascuñana minangka mahasiswa PhD ing Epithelial Biomedicine Group saka Unit Inovasi Biomedis ing CIEMAT.
Kolaborasi: Dr Paula Rio minangka pakar sing diakoni sacara internasional babagan nyunting gen lan terapi gen kanggo penyakit hematopoietik sing diwarisake, saka ilmu dhasar nganti uji klinis.
"Pendekatan panyuntingan gen non-virus iki nggoleki strategi sing murah lan universal kanggo ngasilake perpustakaan alat sing bisa ngatasi kabeh mutasi sing dikenal ... Ing studi pra-klinis mangsa ngarep, gen "patched" keratinosit sing diowahi lan fibroblast saka pasien bakal digunakake. kanggo ngasilake kulit sing padha karo bioengineered.
- Dr Sergio López-Manzaneda
Judhul hibah: Patching suntingan genom non-virus saka COL7A1.
Ing proyek iki, kita ngusulake strategi panyuntingan genom sing fokus ing perawatan ora mung mutasi siji titik nanging klompok mutasi tetanggan sing nyebabake RDEB, kanthi ndandani exon lengkap sing ngemot. "Patching genetik" iki adhedhasar mekanisme perbaikan DNA Homologous Recombination (HR) alami sing difasilitasi dening sistem CRISPR / Cas9. "Patch" makili cithakan DNA donor HDR ganda (300-400 pasangan basa) ganda sing bakal dirancang saka urutan gen sing cukup kanggo nutupi sawetara ekson sing cedhak, ing kasus iki, cocog karo kolagen tipe VII enkoding gen COL7A1. Tujuan kita yaiku kanggo menehi ciri (efikasi, safety) lan nggawe standarisasi panggunaan teknologi kasebut kanthi ide supaya bisa kasedhiya patch khusus kanggo ngatasi klompok mutasi individu. Teknologi non-virus sing diusulake kanggo perawatan sel pasien ex vivo RDEB bakal nggampangake terjemahan menyang klinik kanthi biaya murah.
Salah sawijining pendekatan terapeutik sing paling njanjeni kanggo EB yaiku nyunting genom nggunakake teknologi CRISPR/Cas9. Sajrone 7 taun kepungkur, laboratorium kita aktif ing lapangan iki nyedhiyakake data bukti-konsep sing kuat kanggo nerjemahake asil menyang klinik. Nalika kita ana ing ambang aplikasi klinis kanthi salah sawijining pendekatan kasebut sing entuk sebutan Obat Orphan dening Badan Obat Eropa (EU/3/20/2253), kita terus ngupaya strategi panyuntingan genom sing luwih efisien, luwih aman lan relevan sacara klinis.
Ing proyek iki, kita ngusulake kanggo nguji pendekatan panyuntingan gen sing inovatif sing ora mbutuhake panggunaan vektor virus (kabeh materi dienalake kanthi elektroporasi siji). Tujuane yaiku nggunakake "patch genetik" iki kanggo mbenerake wilayah sing mutasi sawise ngethok wilayah genetik iki kanthi teknologi CRISPR / Cas9. Kita wis dirancang papat beda "patch", iki tegese, dsDNA donor Cithakan khusus diowahi ing ends dening teknologi kepemilikan saka panyedhiya kita (Integrated DNA teknologi, IDT) kanggo HDR sih. Cithakan iki ngemot rong exon lan sakubenge (73 lan 80, loro "patch" saben) lan papat titik potong sing beda (loro kanggo Exon 73 lan loro kanggo exon 80). Cithakan iki (udakara 300-400 bp) uga nutupi ekson pepadhamu.
Kita ngarahake kanggo ngevaluasi ombone ndandani ing "patches" sing bakal ngidini kita ngatasi klompok mutasi utawa, yen sistem kasebut cukup apik, kanggo mbenerake ekson ing "patches". Kita percaya yen novel iki, ora ana virus, strategi panyuntingan gen sing dipersonalisasi bisa gampang diterjemahake menyang klinik kanthi biaya ekonomi sing murah.
Kita wis sukses nggayuh setengah saka tonggak hibah. Kaping pisanan, strategi kita ngarahake nulis ulang genom nggunakake "patch" DNA kanggo nutupi pasangan exon (khusus nargetake mutasi ing pasangan exon: 72-73, 73-74, 79-80, lan 80-81). Nanging, tambalan DNA sing digunakake dadi rada beda karo sing dikarepake. Patch kasebut bisa nulis ulang génom kanthi efisiensi luwih saka 80%, sing luwih dhuwur tinimbang sing dilaporake sadurunge, nanging tumindak kasebut diwatesi ing jendela sing sempit. Amarga iki, strategi fase 2 saiki bakal fokus ing patch DNA individu kanggo saben exon. Kanggo mesthekake yen kita ora ngowahi urutan DNA sing sehat, "potongan molekul" CRISPR / Cas9 mung bakal ngarahake urutan mutasi. Iki mbutuhake RNA cilik tartamtu kanggo saben mutasi, dene patch DNA umum bisa digunakake kanggo saben exon. (Saka laporan Juli 2024).