Skip isi

Scarring in RDEB (2023)

Riset sing bisa nyebabake identifikasi perawatan ing mangsa ngarep kanggo nyuda sawetara gejala RDEB sing ngrusak sing disebabake parut kronis.

Gambar Dr Giovanna Zambruno

Dr Giovanna Zambruno kerja ing Rumah Sakit Anak Bambino Gesù ing Roma, Italia babagan resesif dystrophic epidermolysis bullosa (RDEB). Sawetara gejala RDEB bisa disebabake dening sel kulit sing nggawe jaringan parut (fibrosis) luwih akeh tinimbang sing dikarepake amarga kontrol biasa sing nyegah iki rusak. Pakaryan iki kanggo mangerteni sawetara mekanisme kontrol kasebut kanggo ndeleng apa bisa ditargetake dening perawatan ing mangsa ngarep sing bisa nyuda gejala ing RDEB sing amarga parut.

 

Babagan pendanaan kita

 

Pimpinan Riset Prof Giovanna Zambruno
Lembaga Rumah Sakit Anak Bambino Gesù (IRCCS), Roma, Italia
Jinis EB RDEB
Keterlibatan pasien ora ana. Iki minangka karya pra-klinis ing sel sing ditanam ing laboratorium
Jumlah pendanaan € 196,500 didanai bareng karo DEBRA Austria
Dawane proyek 3 taun
Tanggal wiwitan Maret 2020
ID internal DEBRA Zambruno2

 

Rincian proyek

Nirogacestat, obat sing bubar disetujoni ing AS kanggo nambani jinis pertumbuhan jinak (tumor desmoid) sing ora ana hubungane karo EB, diuji. Iki nggawe sel kulit sing tuwuh ing laboratorium saka wong sing duwe RDEB luwih sehat lan bisa digunakake maneh kanggo nyuda gejala kanggo wong sing nandhang EB.

Peneliti nerbitake asile ing Journal of Investigative Dermatology ing taun 2024 lan ngirim aplikasi paten kanthi irah-irahan "Inhibitor gamma-secretase kanggo digunakake ing perawatan epidermolysis bullosa".

Sel kulit (fibroblast) saka wong sing duwe RDEB lagi ditanem ing laboratorium lan tingkat lan jinis molekul sing diarani microRNA sing diasilake lagi diselidiki. Peranan molekul kasebut kanggo ngontrol jaringan parut (fibrosis) bisa dadi target kanggo terapi EB. Sekawan molekul microRNA wis dipilih kanggo sinau luwih lanjut amarga ana ing tingkat sing luwih dhuwur (telu saka papat) utawa luwih murah ing sel saka wong sing duwe RDEB. Dheweke wis ditampilake mengaruhi proses fibrosis lan inflamasi.

Kapisah, obat sing dikembangake kanggo nambani kanker wis ditampilake minangka terapi potensial kanggo nyuda parut ing RDEB.

Infographic iki, sing diwenehake dening peneliti ing 2022, nggambarake karya sing lagi ditindakake:

 

Scarring ing rdeb infographic

 

 

Prof Giovanna Zambruno (tengen) karo Dr Angelo Giuseppe Condorelli ing ruang kultur sel ing Rumah Sakit Anak Bambino Gesù. Dr Condorelli minangka peneliti pasca-doktoral sing tanggung jawab kanggo proyek kasebut saben dina ing laboratorium.

Gambar Dr Giovanna Zambruno lan Dr Angelo Giuseppe Condorell

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Pimpinan Riset:

Dr Giovanna Zambruno, Konsultan, Rumah Sakit Anak Bambino Gesù, IRCCS, Roma, Italia

Dr. Zambruno lulus ing Kedokteran ing Universitas Pavia, Italia (1982) lan ngrampungake latihan residensi ing Dermatologi lan Venereologi ing taun 1985 ing Universitas sing padha. Sawisé tetunggalan riset ing INSERM Laboratory of Dermatological and Immunological Research lan ing Departemen Dermatologi Universitas Claude Bernard, Lyon, Prancis (1985-1986), dheweke dadi anggota staf ing Departemen Dermatologi, Universitas Modena, ing ngendi dheweke ngadegake. klompok riset pisanan dheweke. Ing 1995, dheweke pindhah menyang Istituto Dermopatico dell'Immacolata (IDI), ing ngendi dheweke dadi Direktur Laboratorium Biologi Molekuler lan Sel (1995-2015) lan banjur dadi Direktur Ilmiah (2017-2018). Dheweke saiki dadi konsultan ing Rumah Sakit Anak Bambino Gesù, Roma, ing ngendi dheweke kerja sama karo Unit Patologi lan Dermatologi lan Divisi Riset Genetik lan Penyakit Langka. Sajrone 25 taun kepungkur, aktivitas klinis lan riset dheweke fokus ing penyakit kulit sing langka, utamane epidermolysis bullosa sing diwarisake. Dheweke wis nulis luwih saka 270 publikasi ing jurnal peer-review, 80 ing epidermolysis bullosa.

Co-investigator:

Dr Teresa Odorisio, Laboratorium Biologi Molekuler lan Sel, IDI-IRCCS, Roma, Italia
Kolaborator: Profesor Leena Bruckner-Tuderman, Universitätsklinikum Freiburg – Hautklinik, Jerman

"Fibrosis sing didorong cedera lan inflamasi minangka fitur sing tetep lan progresif ing RDEB. Iku tanggung jawab kanggo tatanan tangan mitten, contractures perangan awak lan striktur mucosal, lan wis melu ing pangembangan awal lan agresif karsinoma sel skuamosa kulit. Counteracting fibrosis minangka strategi kanggo nambah penyakit lan kualitas urip pasien. Kanggo pisanan, analisa kita bakal nyelidiki tingkat ekspresi saka pirang-pirang miRNA lan peran fungsional ing fibrosis RDEB. Analisis miRNA bakal dadi titik wiwitan kanggo ngenali lan ngilangi target / jalur obat sing bisa diobati kanggo masa depan, strategi terapeutik anti-fibrotik sing inovatif.

- Dr Giovanna Zambruno

Gelar Grant: MicroRNAs ing dystrophic epidermolysis bullosa fibrosis: profiling ekspresi, aktivitas lan perspektif terapeutik

DNA kita digawe saka gen sing nyimpen informasi kanggo mbangun protein sing mbentuk awak kita. Instruksi DNA ditranskripsi dadi molekul RNA sing disebut messenger RNAs (mRNAs), sing bisa ngasilake protein kasebut (terjemahan). Nanging, sawetara RNA, sing disebut RNA non-coding, ora diterjemahake dadi protein nanging ngatur jumlah protein sing diasilake. MicroRNAs (miRNAs) minangka RNA non-coding sing ngalangi produksi protein kanthi interaksi karo mRNA tartamtu. MiRNA minangka regulator kunci kabeh proses biologis lan fungsi ora normal nyebabake akeh penyakit, kalebu kelainan kulit fibrotik (parut).

Ing resesif dystrophic epidermolysis bullosa (RDEB) unremitting blistering ndadékaké kanggo fibrosis abot sing muter peran penting ing pangembangan komplikasi penyakit paling abot. Klompok kita wis mirsani manawa sawetara miRNA luwih akeh ing fibroblast saka pasien RDEB (RDEBFs) lan nindakake aktivitas pro-fibrotik ing vitro. Adhedhasar studi pendahuluan kasebut, proyek saiki duwe tujuan kanggo ngenali miRNA tambahan sing disregulasi ing RDEBFs lan menehi ciri peran ing proses fibrotik utama kayata produksi lan pelepasan molekul pro-fibrotik sing penting (umpamane faktor pertumbuhan transformasi-b1) lan dermal. (kulit) kaku. Panaliten iki bakal nyumbang kanggo nggedhekake kawruh babagan pathomechanisms penyakit lan kanggo ngenali miRNAs novel lan target miRNA minangka target potensial kanggo terapi inovatif kanggo matesi fibrosis.

DNA kita digawe saka gen sing nyimpen informasi kanggo mbangun protein sing mbentuk awak kita. Instruksi DNA ditranskripsi dadi molekul RNA sing disebut messenger RNAs (mRNAs), sing bisa ngasilake protein. Nanging, kulawarga RNA cilik, sing disebut microRNA, ora dadi protèin nanging ngatur jumlah protèin sing diprodhuksi. MicroRNAs ngalangi produksi protein kanthi interaksi karo mRNA tartamtu, sing ditetepake minangka target microRNA. MicroRNA minangka regulator utama kabeh proses biologis lan malfunctioning nyebabake akeh penyakit, kalebu resesif dystrophic epidermolysis bullosa (RDEB) lan komplikasi klinis sing abot, kayata inflamasi kulit, fibrosis lan perkembangan kanker.

Ing jaringan fibrotik, fibroblast ngasilake jumlah protein "fibrotik" sing akeh banget, utamane kolagen, sing disimpen ing njaba sel, lan nampilake kemampuan sing tambah kanggo ngontrak jaringan ing sakubenge, sing nyebabake kaku lan disfungsi jaringan. Panaliten sadurunge nuduhake manawa mikroRNA sing jenenge miR-145-5p, luwih akeh ing fibroblast saka pasien RDEB lan nuduhake peran ing proses fibrotik. Ing proyek iki, kita ngevaluasi kelimpahan atusan microRNA bebarengan lan miwiti njelajah fungsine. Kita nemtokake klompok 36 microRNAs deregulasi ing fibroblasts RDEB (yaiku molekul paling ora kaping pindho utawa kurang akeh babagan sel saka donor sehat). Sawisé iku, kita milih kanggo investigasi luwih saka papat microRNAs, saiki ing jumlah tambah utawa suda ing sel RDEB dibandhingake kontrol. Kita mirsani manawa modulasi farmakologis saka microRNA iki bisa nglawan produksi protein fibrotik khas dening fibroblast RDEB.

Ing podo karo, kita deepened pasinaon kita ing mekanisme molekul mentas dikenali melu fibrosis RDEB, jenenge Notch pathway. Jalur seluler kasusun saka seri tumindak sing diatur kanthi apik sing didorong dening molekul tartamtu (dijenengi anggota jalur), nyebabake kedadeyan biologis sing beda, kayata divisi sel, gerakan utawa fibrosis. Pasinaon kita nedahake manawa inhibisi jalur Notch kanthi pendekatan sing beda-beda, kalebu obat-obatan sing kasedhiya kanthi komersial nanging nganti saiki digunakake kanggo nambani penyakit sing beda karo RDEB, kanthi nyata nyuda sawetara sifat pro-fibrotik ing sel RDEB. Secara rinci, fibroblast RDEB sing diobati kanthi molekul spesifik sing nyuda aktivitas Notch nuduhake kemampuan sing suda i) kanggo ngontrak gel kolagen (sing makili model kemampuan fibroblast kanggo nyilikake jaringan ing sakubenge), ii) kanggo nyimpen protein "serat" (kolagen) ing njaba sèl, iii) kanggo mbebasake molekul fibrotik sing paling penting, yaiku faktor pertumbuhan ubah 1, iv) kanggo obah lan proliferasi, lan (v) kanggo ngasilake macem-macem molekul sing biasane akeh ing jaringan fibrotik. Digabungake, data kita ndhukung relevansi biologis Notch pathway ing proses penyakit sing gegandhengan karo RDEB, lan inhibisi minangka target terapeutik inovatif kanggo nglawan fibrosis kulit. (Saka laporan kemajuan 2022).

Materi genetik kita (urutan DNA lan RNA) nyimpen lan ngirim informasi kanggo mbentuk kabeh komponen awak, kalebu protein lan enzim, lan kanggo nindakake proses penting. Jumlah lan aktivitas sing tepat saben molekul biologis penting kanggo njamin fungsi jaringan lan organ lan, kanthi mangkono, tetep sehat. Secara khusus, kelimpahan protein dikontrol dening mekanisme genetik sing beda-beda, kalebu tumindak microRNAs - kulawarga sing amba (> 2500 anggota) molekul RNA cendhak kanthi peran pangaturan.

MicroRNAs nyegah produksi protein kanthi nyandhet "transisi" template protein, sing disebut messenger RNAs (mRNAs), dadi protein. Saben microRNA modulates sakumpulan mRNAs / protein tartamtu, ditetepake minangka target microRNA ing sel- lan proses gumantung konteks. MicroRNAs malfunctioning nyumbang kanggo macem-macem penyakit, kalebu wangun dystrophic resesif saka epidermolysis bullosa (RDEB) lan komplikasi klinis abot, kayata inflammation, fibrosis lan pangembangan kanker.

Ing jaringan fibrotik, sel dermal-penduduk utama, sing diarani fibroblast, ngasilake jumlah protein "fibrous" sing akeh banget lan molekul "pro-fibrotik", sing nyumbang kanggo kaku kulit lan disfungsi fibroblast.

Ing panliten iki, kita ngenali lan nyelidiki fungsi biologi saka rong microRNA, miR-129-1-3p lan miR-210-3p, sing ditemokake disregulasi ing fibroblast sing dipikolehi saka pasien karo RDEB (RDEB-FBs). Khususé, jumlah miR-210-3p ditambah ing RDEB-FBs nalika miR-129-1-3p dikurangi dibandhingake karo sel saka donor sehat. Ing RDEB-FBs, inhibisi farmakologis miR-210-3p dening molekul sing ditetepake "anti-miR" nyuda kemampuan RDEB-FBs kanggo mindhah, sing diarani "tingkat migrasi", lan kanggo sintesis protein pro-fibrotik. , kalebu klompok molekul sing melu respon seluler marang karusakan sing disebabake stres oksidatif. Ing set eksperimen sing beda-beda, paningkatan tingkat miR-129-1-3p kanthi molekul sing ditetepake "mimik" (miR-129-1-3p-mimic) nyuda kontraktilitas sel - ciri khas fibroblast pro-fibrotik - lan suda. ekspresi pilihan protein pro-fibrotik. Temuan kasebut nuduhake peran anti-fibrotik miR-129-1-3p lan, kanthi mangkono, efek ngrugekake saka downregulation ing fibroblasts pasien.

Salajengipun, kita ngidentifikasi lan validasi protein pro-fibrotik novel sing diatur dening miR-129-1-3p, tegese tingkat miR-129-1-3p sing kurang (kaya sing diamati ing fibroblast RDEB) cocog karo tingkat sing luwih dhuwur saka miR anyar iki. -129-1-3p target molekuler.

Ing paralel, kita ngrampungake panaliten sing nggambarake peran pro-fibrotik anggota jalur NOTCH ing fibrosis RDEB. Secara rinci, temuan kita sing dipikolehi ing fibroblast saka pasien karo RDEB ngandhakake yen inhibisi NOTCH signaling cascade dening PF-03084014 (nirogacestat), sawijining molekul saka kulawarga inhibitor gamma-secretase, kanthi nyata nyuda sifat fibrotik sing beda-beda saka deposisi kolagen menyang sekresi faktor fibrosis-inducing TGF-ß1 lan produksi protein pro-fibrotik. Cathetan, PF-03084014 bubar disetujoni dening FDA kanggo perawatan tumor desmoid lan dikomersialake minangka OgsiveoTM dening SpringWorks Therapeutics Inc. Ing mangsa ngarep, obat iki bisa dimanfaatake kanthi efisien kanggo repurposing kanggo digunakake minangka agen anti-fibrotik ing RDEB. Kesimpulane, data kita ndhukung relevansi biologis jalur NOTCH ing proses penyakit sing gegandhengan karo RDEB, lan inhibisi dening molekul tartamtu minangka strategi terapi inovatif kanggo nglawan fibrosis kulit ing RDEB. (Saka laporan pungkasan 2024).